實(shí)驗(yàn)案例
2024/5/24 9:52:14
多樣品組織研磨儀研磨水稻葉片提取RNA實(shí)驗(yàn)|優(yōu)化提取流程
來源：上海凈信
實(shí)驗(yàn)樣品：本次實(shí)驗(yàn)樣品為水稻葉片，此次選用凈信多樣品組織研磨進(jìn)行前處理操作，提取RNA實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>植物核酸提取是一個(gè)通過簡(jiǎn)易化、可操作性的手段獲取“pure” DNA和RNA的過程。植物組織越幼嫩新鮮所含的次生代謝產(chǎn)物越少，隨著植物組織的逐漸成熟，次生代謝產(chǎn)物的含量會(huì)逐漸增多。植物多糖理化性質(zhì)和核酸相似，在提取過程中容易和核酸一起沉淀，很難去除。如果去除不徹底，多糖抑制許多酶的活性，被多糖污染的核酸無法用于很多分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。植物細(xì)胞不同于動(dòng)物細(xì)胞，有著厚厚的細(xì)胞壁。傳統(tǒng)方法破碎費(fèi)時(shí)費(fèi)力，效果差，且易出現(xiàn)交叉污染。Tissuelyser系列樣本制備儀用裂解珠碰撞法（beads-beating）能夠處理各種類型植物樣本，包括根、莖、葉、種子以及藻類等；可在數(shù)秒內(nèi)徹底破碎植物細(xì)胞膜和纖維素細(xì)胞壁且無交叉污染、核酸蛋白易降解等問題。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：
多樣品組織研磨儀 Tissuelyser-192L
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、準(zhǔn)備多樣品組織研磨儀-192L一臺(tái)，96深孔板2塊，5mm研磨珠。
2、96深孔本以及適配器放入液氮冷凍。
3、將深孔板放入儀器內(nèi)，旋緊螺帽。
4、按運(yùn)行鍵啟動(dòng)，進(jìn)行樣品研磨。
5、研磨結(jié)束，關(guān)閉電源，將研磨罐從研磨倉取出，用開蓋工具打開蓋子，取出樣品即可。
實(shí)驗(yàn)對(duì)比圖：
樣本研磨前后效果圖
注意事項(xiàng)：
1、按照樣品量來選擇研磨珠配比和參數(shù)設(shè)置，能達(dá)到好的效果，有不清楚的及時(shí)問上海凈信銷售人員。
2、往適配器里放研磨管時(shí)注意平面配平，保證適配器壓蓋在水平線。
本次實(shí)驗(yàn)通過使用多樣品組織研磨儀Tissuelyser-192L對(duì)水稻葉片進(jìn)行研磨，并成功提取了RNA。實(shí)驗(yàn)過程中，我們深刻體會(huì)到了研磨儀在植物組織研磨和RNA提取方面的顯著優(yōu)勢(shì)。裂解珠碰撞法不僅能夠在短時(shí)間內(nèi)徹底破碎植物細(xì)胞壁，還避免了傳統(tǒng)方法中的費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效果差以及交叉污染等問題。通過本次實(shí)驗(yàn)，我們驗(yàn)證了該研磨儀在處理植物樣本、尤其是水稻葉片方面的有效性，并成功獲得了高質(zhì)量的RNA樣本。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了有力的支持。同時(shí)，我們也意識(shí)到在實(shí)驗(yàn)中合理設(shè)置研磨珠配比和參數(shù)的重要性，以及實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)，這將有助于我們更好地進(jìn)行類似實(shí)驗(yàn)，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
